幸运赛车平台

联系我们 / Contact

  • 山东东达纤维素有限公司
  • 联系人:王伟
  • 电 话:0533-8299008 13280657534
  • 手 机:13280657534
  • 传 真:请填写您的传真
  • 邮 箱:sddachina@163.com
  • 网 址:http://www.kygdzz.com/
  • 地 址:山东省淄博市周村区开发区工业园16号

原子力显微镜研究生物样品时存在的问题

发布日期:2015-06-04 09:58:38
虽然人类在生命科学上已经取得了前所未有的成就,但是一些与人类生命非 常密切的物质仍然没有得到很好的解决。原子力显微镜作为一种高分辨的结构图 像与功能已经在生命科学领域显示出了很大的优势,并且得到了非常广泛的应 用,随着科学的发展,原子力显微镜必将起着很大的作用,但是在生命科学的领 域内仍有一些问题没有得到及时的解决,从而制约了原子力显微镜在生命科学领 域中进一步的科学研宄。
对于原子力显微镜的扫描速度一般来讲比较偏低,一般需要几分钟的时间才 能得到一个高分辨率的图像。然而对于很多的化学反应来讲都是在很短的时间内 完成的,因此不能实时观测该化学反应的变化。有相应的文献报道了关于高速扫 描的原子力显微镜,Viani和他的同事们研发了一种比较柔软并且非常短的悬臂, 然而他有很高的共振频率[45-46]。
虽然,使用弹性系数较小的针尖,而且施于针尖的力尽量可能小,但是由于 生物样品表面过于柔软,针尖的污染难以避免。针尖污染后,要对针尖进行一定 的处理,否则要更换新的针尖,我们实验过程中主要使用紫外光、超声波等一些 简单的清洗,或者将退针一定的距离,对针尖进行施加较大幅度的震荡,有可能 会使污染物震掉,有时一些成像效果依然较差。经过大量的实验证明,污染后的 针尖会造成图像的模糊,假象增加等情况。
我们平常虽然常常说到原子力显微镜能够观测到单个原子,这是有一定的条 件制约的,对于进行生物大分子观测的时候远远达不到这样的分辨率,主要原因 是在进行原子力显微镜扫描的时候一般采用轻敲模式,在这种模式下很难得到原 子图像,如果利用接触模式的话,对生物样品有很的损害。再次来讲,针尖的曲 率半径是影响原子力显微镜分辨率的一个重要因素,经过几十年的发展,新的碳 纳米管针尖可以大大改变针尖曲率半径的影响,一般的碳纳米管针尖的曲率半径 为0.5-2nm,如果这作为原子力显微镜的针尖将会大大提高分辨率。因此碳纳米 管针尖是AFM探针的未来发展的一个重要方向。 2.4.1生物大分子样品的制备及储存方法
生物大分子的制备过程包括选材、萃取和分离、生物大分子提取纯化、以及 样品浓缩干燥和储存等。因此生物大分子的制备是一项十分细致的工作,既要设 法得到它们的纯品,又要努力保持其生物活性。有时制备一个具有生物活性、纯 度较高的的,需要付出较长时间的艰苦劳动。
生物大分子的制备有以下主要特点
(1)对于一般的生物材料的组成是非常复杂,常常包含有数百种乃至数千种 化合物。其中许多化合物至今还是个谜,期待着人们研宄与开发。然而有的生物 大分子在萃取和分离的过程中仍然在进行代谢,因此生物大分子的萃取和分离方 法差别很大,如果想找到一种适合各种生物大分子分离制备的标准是很困难的。
(2)很多生物大分子在生物材料中的含量很少,只有万分之一、几十万分之 一,甚至几百万分之一。他们在分离纯化的过程繁琐,有的目的产物要经过几十 步、甚至上百步的操作才能达到所需纯度的要求。
(3)—些生物大分子脱离了生物体内的环境时,就失去了活性,为了在配制 生物大分子样品的时为了防止其失活,在实验中就要培养近生物环境的溶液,这 是配制生物大分子的最困难之处。过酸、过碱、高温、剧烈的搅拌、强辐射及本 身的自溶等都会使生物大分子变性而失去活性,因此在配制的时候一定要选用最 适宜的环境和条件。
(4)生物大分子的制备一般情况下都是在溶液中进行的,温度、pH值、离子 强度等各种因素对溶液中各种组成的综合影响,有时间不容易准确的估计和判断,因此在试验结果上有很大的经验成分在里面,对于一些实验的重复性较差, 个人的实验技术水平以及平常的经验对实验结果会有很大的影响。
生物大分子制成品的正确保存极为重要,一旦保存不当,辛辛苦苦制成的样 品失活、变性、变质,使前面的全部制备工作化为乌有,损失惨重,全功尽弃。 生物大分子样品保存要注意以下几个因素:
(1)空气:空气的影响主要是潮解、微生物污染和自动氧化。空气中微生物 的污染会使生物样品腐败变质,生物样品吸潮后可能会引起潮解变性,也为微生 物污染提供了有利的条件。然而某些样品与空气中的氧接触会自发引起游离基链 式反应,还原性强的样品易氧化变质和进一步是生物样品失去活性。
(2)温度:每一种生物大分子都有其稳定的温度范围,一般来讲当温度升高 10°C,氧化反应就会加快数倍,酶促反应增加1〜3倍。因而绝大多数生物样品 样品通常都是低温保存,以抑制氧化、水解等化学反应和微生物杂质的生成。因 此我们超净间的温度一般保持在24〜26C左右,生物样品制备完成后保存在4C 左右的冰箱内。
(3)水份:包括样品本身所带的水份和由空气中吸收的水份。水可以参加水 解、酶解、水合和加合。加速氧化、聚合、离解和霉变。因此我们超净间的湿度 为一般保持在40〜50%。
(4)光线:一些生物大分子可以吸收一定波长的光,使分子活化从而不利于 样品保存,尤其日光中的紫外线和紫外灯的能量大,对生物大分子样品影响最 大,样品受光催化的反应有变色、氧化和分解等,通称光化作用。因此一些不宜 见光的生物样品一定要避光保存。
(5)样品的pH:保存液态样品时注意其稳定的pH范围,通常可从文献和手册 中查得或做实验求得,因此正确选择保存液态样品的缓冲剂的种类和浓度就十分
重要。
(6)时间:生物大分子样品不可能永久存活,就是保存在适当的温度不可能
永久的保存,因此不同的生物样品有其不同的有效期,因此,保存的样品必须写 明日期,定期检查和处理。
 
内蒙古快3走势图 秒速快3 865棋牌 幸运赛车 幸运赛车开奖直播 幸运赛车人工计划 广西快乐十分APP下载 幸运赛车官网 广东快乐十分APP下载 秒速快3