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纤维素含量测定方法

发布日期:2015-10-28 18:04:31
  纤维素由野葡萄糖基组成,它是组成动物细胞壁的根本因素。其含量的多少联系到动物 的机器机构能否兴旺,农作物抗倒悬、抗毁虫灾的威力能否较强,况且反应到食粮农作物、纤维农作物和蔬菜农作物等的产量和质量。
  正在各族食粮中纤维素的含量各没有相反,与籽粒皮肤厚薄成反比。同种食粮中,原粮纤维素  维素含量最高,加工粗加工精密度越高,纤维素含呈越少,如麦子规范粉约O.7%。稻谷约9.0%,糙米约1.0%,白米约0 4%。因而,依据纤维素的含量的测定,能够判断籽粒皮肤的厚薄,食粮加工精密度上下和养分价格评价。
纤维素含量测定方法
  纤维素的测定方法有酸碱醇醚法、碱性洗濯剂法、碘量法及比色法。第一度是国标法,但比拟烦琐,后者操作比拟容易。 一、方法原理纤维素是由野葡萄糖基组成的多糖,正在碱性环境下加热使其电离成野葡萄糖。而后正在浓硫酸作用下,使单糖脱发生成糠醛类复合物。应用蒽酮试药与糠醛类复合物的蓝绿色反响即可停止比色测定。  二、仪表和试药.次要仪表 候温水浴、冰罐、电炉、玻璃坩埚、漏子、定计钟、分光光度计等。      2.试 剂 60% H2SO4滤液、浓H2SO4。
  %蒽酮试药:2g蒽酮溶化于100rnl醋酸乙酯中,贮置于棕色试药瓶中。
  纤维素规范液:精确称取100mg纯纤维素,放入100Inl量瓶中,将量瓶放入冰浴中,而后加冷的60%H2SO4 60— 70ml,正在冷的环境下食积解决 20—30min,而后用60%H2SO4浓缩至刻度,摇匀。汲取此液5.0ml放入另一50ml量瓶中,将量瓶放入冰浴中,加醇化水浓缩刻度,则每毫升含100μg纤维素。  三、操作方法.制图纤维素规范直线
  (1)取6支小滴管,辨别放入0、 0.40、0.80、1.20、1.60、2.00ml纤维素规范液。而后辨别退出2.00、1.60、1.20、0.80、 0.40、0ml醇化,摇匀。则每管顺次含纤维素0、40、 80、120、160、200μg。
  (2)向每管加0.5ml% 蒽酮试药,再沿管壁加5.0ml浓H2SO4,塞上塞子,轻轻撼动,驱使醋酸乙酯电离,当管内涌现蒽酮絮状物时,再猛烈撼动推进蒽酮溶化,而后即时放入沸水浴中加热10min ,存入结冰。
  (3)正在分光光度计上620urn跨度下比色,测出各管消光值 。
  (4)以所测得的消光值为纵坐标,以纤维素含量为横坐标,制图纤维素规范直线。      2.样品的测定(1)精确称取风干的样品100mg,放入100rnl量瓶中,将量瓶放入冰浴中,加冷的60%H2SO4。60—70ml,正在冷的环境下食积解决半时辰,而后用60%H2SO4。浓缩至刻度,摇匀,用玻璃坩埚漏子过滤。
  (2)汲取上述溶液5.0ml,放入5ml量瓶中,将量瓶置于冰浴中,加醇化水释至刻度,摇匀。       (3)汲取上液2.0ml,加0.5ml 2% 蒽酮试药,再沿管壁加5.0ml浓 H2SO4 ,盖上塞子,当前操作同纤维素规范液,测出样品正在620urn跨度下的消光值。
  纤维素是动物细胞壁的次要因素之一,纤维素含量的多少,联系到动物细胞机器机构兴旺与否。因此反应农作物的抗倒悬,抗毁虫灾威力的强弱。测定食粮、蔬菜及纤维农作物货物中纤维素含量是鉴定其质量是非的主要目标。
  一、原理
  纤维素(cellulose)为β——野葡萄糖残基组成的多糖,正在碱性环境下加热量合成成β——野葡萄糖。β——野葡萄糖正在弱酸作用下,可脱发生成β——糠醛类复合物。β——糠醛类复合物与蒽酮脱发缩合,生成黄色的糠醛派生物。色彩的深度可直接容量测定纤维素含量。
  二。资料、仪表设施及试药
  (一)资料:烘干的米、白面或者风干的棉、麻纤维。
  (二)仪表设施:1. 小滴管;2. 量筒;3. 玻璃杯;4. 移液管;5. 定量瓶;6. 布氏漏子;7. 综合天平;8. 水浴锅;9. 电炉;10. 分光光度计。
  (三)试药:1. 60%H2SO4滤液;2. 浓H2SO4(AR);3. 2%蒽酮试药:将2g蒽酮溶化于100ml醋酸乙酯中,贮放于棕色试药瓶中;4. 纤维素规范液:精确称取100mg纯纤维素,放入100ml量瓶中,将量瓶放入冰浴中,而后加冷的60%H2SO460——70ml,正在冷的环境下食积解决20——30min;而后用60%H2SO4浓缩至刻度,摇匀。汲取此液5.0ml放入另一50ml量瓶中,将量瓶放入冰浴中,加醇化水浓缩至刻度,则每ml含100μg纤维素。
纤维素含量测定方法
  三。试验方法
  (一)求测纤维素规范归队方程
  支小滴管,辨别放入0,0.40,0.80,1.20,1.60,2.00ml纤维素规范液,而后辨别退出2.00,1.60,1.20,0.80,0.40,0ml醇化水,摇匀,则每管顺次含纤维素0,40,80,120,160,200μg。
  向每管加0.5ml2%蒽酮,再沿管壁加5.0ml浓H2SO4,塞上塞子、摇匀,静置1min。而后正在620nm下,求测没有同含量纤维素滤液的吸光度。
  以测得的吸光度为Y值,对于应的纤维素含量为X值,求得Y随X而变的归队方程。
  (二)样品纤维素含量的测定
  称取风干的草棉纤维0.2g于玻璃杯中,将玻璃杯置冷水浴中,退出60%H2SO460ml,并食积30min,而后将食积好的纤维素滤液转入100ml定量瓶,并用60%H2SO4定容至刻度,摇匀后用布氏漏子过滤于另一玻璃杯中。
  取上述溶液5ml放入100ml定量瓶中,正在冷水浴上加醇化水浓缩至刻度,摇匀后用。
  取2中的滤液2ml于具塞滴管中,退出0.5ml 2%蒽酮试药,并沿管壁加5ml浓H2SO4,塞上塞子,摇匀,静置12min,而后正在620nm跨度下,求测吸光度。
  四、后果与综合
  依据测得的吸光度按归队方程求出纤维素的量,而后按下式打算样品纤维素的含量:
  =X×10-6×a×
  式中:X——按归队方程打算出纤维素含量(μg)。W——样品重(g)。10-6——将μg折算成g的系数。A——样品浓缩折扣。Y——样品中纤维素含量(%)。
  因为膳食纤维与人体衰弱的联系日益遭到注重,急迫需求食物中膳食纤维各因素的数据,这对于测定食物中膳食纤维的方法学钻研提出了请求。小结膳食纤维综合方法,其原理次要是根据膳食纤维可停止的化学反响和酶反响,历史上膳食纤维综合的主要方法囊括非酶分量法如粗纤维、中性洗濯剂纤维和碱性洗濯剂纤维的综合方法;酶分量方法次要有AOAC需要的总纤维、可溶纤维和没有溶纤维的测定方法;酶化学方法次要有酶显色法、酶气相色谱法、酶低压液相色谱法,以及非洲呼应组织关于膳食纤维测定的各族钻研和使用方法。
  本国的没有同单位依据没有同声代膳食纤维综合方法的改良,公布了系万国度规范方法。最早的规范是本国保健部1985公布GB5009. 10-85(药品中粗纤维的测方法),该方法原理是正在硫酸作用下,样品中的糖、小粉、果胶质和半纤维素经水消除去后,再用碱解决,除了蛋白胨及脂膏酸,存在的残渣为粗纤维。如内中含有没有溶于酸碱的杂质,可灰化后除了。该规范用来动物类药品中粗纤维含的测定。以该综合方法为根底,国度规范局1985年公布了GB5515-85食粮、油料测验一粗纤维素测定法,用来指点货物食粮中粗纤维素的测定。生意部1987年出面了GB8310-87茶粗纤维测定,用来茶叶中粗纤维含的测定。1989年出面GB10469-89水果、蔬菜粗纤维的测定方法,用来水果、蔬菜货物粗纤维含量的测定。
  粗纤维测定法是Einhof正在1801-1809年构建的,别称食积方法。内中的木质素正在碱食积进程中少量溶化,半纤维素正在酸、碱食积进程中均少量溶化。该法可回收5096-80%的纤维素,20%的半纤维素,1096-50%的木质素。该方法没有能彻底回收任何化学因素。
  GB9822-88(谷物没有溶性膳食纤维测定法)是生意部1988年同意的用来谷物没有溶性膳食纤维的测定,该方法原理是谷物样品经中性洗濯剂滤液浸煮,残渣用热水充足洗濯后,退出a一小粉酶滤液以合成残留的联合态小粉,再用电、盐酸安非拉酮洗濯,烘干即得没有溶性膳食纤维。GB12394-90(药品中没有溶性膳食纤维的测定方法),保健部1990年公布,是本国眼前广泛运用的方法。该规范规则了食物中没有溶性膳食纤维的中性洗濯剂测定方法,实用于各类动物性食物和含有动物性食物的混合食物中没有溶性膳食纤维的测定,其最小检出限为O.lmg.该方法原理是正在中性洗濯剂(次要因素一般是十二氢氧基硫酸钠)的食积作用,样品中的糖、小粉、蛋白胨、果胶等精神被溶消除去,没有能食积的残渣为没有溶性膳食纤维,次要囊括纤维素、半纤维素、木质素、角质和二氧化硅等,并囊括没有溶性灰分。该法测得的纤维称为中性洗濯剂纤维。若采纳碱性洗濯剂(次要因素是十六烷三甲基澳化按)对于样品停止食积,则测得的纤维称为碱性洗濯剂纤维。中性洗濯纤维素是对于总的动物细胞壁含量的约莫,次要囊括纤维素、半纤维素和木质素。碱性洗濯纤维是对于纤维素和木质素含量的约莫,依据二者的差值可测评粮草中半纤维素含。粗纤维中纤维素、半纤维素和木质素的对比罕用于指点猪粮草原料药的配制。
纤维素含量测定方法
  与粗纤维测定法相比,洗濯剂测定法能够回收全副的纤维素、没有可溶性半纤维素、木质素。但洗濯剂法只能测定没有可溶性膳食纤维,没有能测定可溶性膳食纤维。随着对于膳食纤维钻研的晋级,以及越来越多的膳食纤维种类的涌现,之上保守的非酶一分量法已体现出显然的有余。
  酶一分量法是20百年$0时代停滞兴起的,现已变化AOAC肯定的方法。它是模仿膳食纤维正在人消化道里停止的自然化学反响停止检测。该法可综合药品中的总膳食纤维(DF)、可溶性膳食纤维(SDF)和没有溶膳食纤维(IDF)。其综合原理是辨别用热稳固的a一小粉酶、卵白酶、野葡萄糖昔酶停止酶解食积样品以去除蛋白胨和小粉。DF的测定是先酶解,而后用乙醉积淀,将杞人忧天的DF残渣用乙醉和盐酸安非拉酮显影,枯燥后称重。IDF和SDF是正在样品酶解后立刻将IDF过滤,过涟后的残渣用热水显影,经枯燥后称重。SDF是将上述滤出液用乙醉积淀,将滤渣千燥、称重。最初DF, IDF和SDF的含经过蛋白胨和灰分含停止校对于。
  该方法适于正常食物如谷类、蔬菜等和卫生药品的测定。是眼前国内上使用最宽泛的方法。然而该法测定总膳食纤维是依据膳食纤维没有溶于酶解液,从4倍容积的9596乙醉混合液结合进去的,一些可溶性膳食纤维(集合度DP正在3-12)如菊糖、聚野葡萄糖、抗性糊精、抗性寡糖等低成员量膳食纤维可全体或者全副溶化正在?8%的乙醉滤液里,没有能用该法测出,那样就招致后果偏偏低。
  酶化学法也是AOAC肯定的膳食纤维综合方法,本国对于该方法的钻研还很无限,该方法是从化学综合动手,经过测定每一详细组成因素的含量得其总S o此方法可测定总膳食纤维、中性糖、糖醛酸的残留全体以及木质素。此方法系用酶解方法将小粉去除,而后用乙醉使可溶性的多聚容积淀进去,再用硫酸电离此积淀物中的没有可溶多糖使内中的中性糖开释进去。此中性糖由气相色谱定综合。碱性电离液中的糖醛酸用比色法容量检测,木质素则用重法测定。最初中性糖+糖醛酸+木质素二DF.该方法可容量测定内中每一种中性糖和总的碱性精神(糖醛酸),还可共同测定木质素,但因受仪表设施限制,因此没有实用于通例的膳食纤维综合。
  仪表法是最近多少年崛起的方法,次要是经过粗纤维测定仪停止测定。CXC系列粗纤维测定仪是根据眼前罕用的酸碱消煮法消煮样品,并停止分量测定来失去试样的粗纤维含量的仪表。粗纤维测定仪采纳深浅精确的酸和碱,正在一定环境下消煮样品,再用酒精除了可溶精神,经低温灼烧后扣除矿精神的量,所含量称粗纤维。它没有是一度确实的化学实业,但是正在公认强迫规则的环境下测出的概况成分,内中以纤维素为主,再有大批半纤维素和木质素。
  总之,之上膳食纤维综合方法都有各自的优缺欠,用目后任何一种膳食纤维测定方法均没有能测定药品中的一切膳食纤维含量。
 
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